मलेरिया पीएफ/पैन एंटीजन रैपिड टेस्ट किट (कोलाइडल गोल्ड)

मलेरिया एक मच्छर जनित, हीमोलाइटिक, ज्वर संबंधी बीमारी है जो 200 मिलियन से अधिक लोगों को संक्रमित करती है और प्रति वर्ष 1 मिलियन से अधिक लोगों को मारती है।यह प्लाज्मोडियम की चार प्रजातियों के कारण होता है: पी. फाल्सीपेरम, पी. विवैक्स, पी. ओवले और पी. मलेरिया।ये प्लास्मोडिया सभी मानव एरिथ्रोसाइट्स को संक्रमित और नष्ट कर देते हैं, ठंड लगना, बुखार, एनीमिया और स्प्लेनोमेगाली पैदा करते हैं।पी. फाल्सीपेरम अन्य प्लास्मोडियल प्रजातियों की तुलना में अधिक गंभीर बीमारी का कारण बनता है और अधिकांश मलेरिया से होने वाली मौतों के लिए जिम्मेदार है।पी. फाल्सीपेरम और पी. विवैक्स सबसे आम रोगजनक हैं, हालांकि, प्रजातियों के वितरण में काफी भौगोलिक भिन्नता है।

परंपरागत रूप से, मलेरिया का निदान परिधीय रक्त के गिमेसा दाग वाले मोटे स्मीयरों पर जीवों के प्रदर्शन द्वारा किया जाता है, और प्लास्मोडियम की विभिन्न प्रजातियों को संक्रमित एरिथ्रोसाइट्स1 में उनकी उपस्थिति से अलग किया जाता है।तकनीक सटीक और विश्वसनीय निदान करने में सक्षम है, लेकिन केवल तभी परिभाषित प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए कुशल सूक्ष्मदर्शी द्वारा किया जाता है, जो दुनिया के दूरस्थ और गरीब क्षेत्रों के लिए प्रमुख बाधाएं प्रस्तुत करता है।

इन बाधाओं को दूर करने के लिए मलेरिया पीएफ/पैन एंटीजन रैपिड टेस्ट किट विकसित की गई है।परीक्षण पी. फाल्सीपेरम विशिष्ट प्रोटीन, हिस्टिडाइन रिपीट प्रोटीन II (pHRP-II) के लिए मोनोक्लोनल और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी की एक जोड़ी का उपयोग करता है, और मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की एक जोड़ी को प्लास्मोडियम लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज (pLDH) की चार प्रजातियों द्वारा उत्पादित प्रोटीन का उपयोग करता है। प्लाज्मोडियम, इस प्रकार पी. फाल्सीपेरम और या अन्य तीन प्लाज्मोडिया में से किसी के साथ संक्रमण का एक साथ पता लगाने और विभेदन करने में सक्षम बनाता है।यह प्रयोगशाला उपकरणों के बिना अप्रशिक्षित या न्यूनतम कुशल कर्मियों द्वारा किया जा सकता है।

Pf/Pan मलेरिया रैपिड टेस्ट किट एक लेटरल फ्लो क्रोमैटोग्राफिक इम्यूनोएसे है।परीक्षण पट्टी घटकों में शामिल हैं: 1) एक बरगंडी रंग का संयुग्म पैड जिसमें कोलाइड गोल्ड (पीएचआरपी II-गोल्ड संयुग्मित) के साथ माउस एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी संयुग्मित होता है और कोलाइड गोल्ड (पीएलडीएच-गोल्ड संयुग्मित) के साथ माउस एंटी-पीएलडीएच एंटीबॉडी संयुग्मित होता है।

2) एक नाइट्रोसेल्युलोज झिल्ली पट्टी जिसमें दो परीक्षण बैंड (पैन और पीवी बैंड) और एक नियंत्रण बैंड (सी बैंड) होता है।पैन बैंड मोनोक्लोनल एंटी-पीएलडीएच एंटीबॉडी के साथ प्री-कोटेड है, जिसके द्वारा प्लास्मोडिया की चार प्रजातियों में से किसी भी संक्रमण का पता लगाया जा सकता है, पीएफ बैंड पीएफ संक्रमण का पता लगाने के लिए पॉलीक्लोनल एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी के साथ प्री-कोटेड है, और सी बैंड बकरी विरोधी माउस आईजीजी के साथ लेपित है।

परख के दौरान, रक्त के नमूने की पर्याप्त मात्रा परीक्षण कैसेट के नमूने (एस) में वितरित की जाती है, बफर वेल (बी) में एक लिसीज़ बफर जोड़ा जाता है।बफर में एक डिटर्जेंट होता है जो लाल रक्त कोशिकाओं को लाइसेस करता है और विभिन्न प्लास्मोडियम एंटीजन को रिलीज करता है, जो कैसेट में रखी पट्टी में केशिका क्रिया द्वारा माइग्रेट करता है।pHRP-II यदि नमूने में प्रस्तुत किया जाता है तो pHRP II-स्वर्ण संयुग्मों से जुड़ जाएगा।इसके बाद प्री-कोटेड एंटी-pHRPII एंटीबॉडीज द्वारा झिल्ली पर इम्युनोकॉम्प्लेक्स कब्जा कर लिया जाता है, जो एक बरगंडी रंग का Pf बैंड बनाता है, जो Pf सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देता है।pLDH अगर नमूने में प्रस्तुत करता है तो pLDH स्वर्ण संयुग्मों से जुड़ जाएगा।इसके बाद प्री-कोटेड एंटी pLDH एंटीबॉडी द्वारा झिल्ली पर इम्युनोकॉम्प्लेक्स कब्जा कर लिया जाता है, जो एक बरगंडी रंग का पैन बैंड बनाता है, जो प्लाज्मोडियम सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देता है।पैन बैंड की अनुपस्थिति में, अन्य तीन प्लास्मोडिया में से किसी के लिए सकारात्मक परीक्षा परिणाम की सिफारिश की जा सकती है।

किसी भी परीक्षण बैंड (पैन और पीएफ) की अनुपस्थिति एक नकारात्मक परिणाम का सुझाव देती है।परीक्षण में एक आंतरिक नियंत्रण (सी बैंड) होता है जो किसी भी परीक्षण बैंड पर रंग के विकास की परवाह किए बिना बकरी विरोधी माउस आईजीजी / माउस आईजीजी (पीएचआरपी-द्वितीय और पीएलडीएच-गोल्ड संयुग्म) के इम्यूनोकॉम्प्लेक्स के बरगंडी रंग के बैंड को प्रदर्शित करता है। .अन्यथा, परीक्षा परिणाम अमान्य है और नमूना को किसी अन्य डिवाइस के साथ पुन: परीक्षण किया जाना चाहिए।